抗-Cry2Aa单链抗体分子互作及荧光免疫检测研究

• 作者: 刘贤金 张存政 武爱华 王耘
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: Cry2Aa毒素 单链抗体 时间分辨荧光免疫分析 同源模建 分子对接
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 309-312,292
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2017.6.045

摘要

Cry2Aa毒素是一种新型生物农药,分析该毒素与特异性单链抗体分子互作,并建立快速检测毒素残留的方法对保障食品和生态安全有重要意义.本研究以同源蛋白为模板对单链抗体进行建模,并进行了Cry2Aa毒素与单链抗体的分子对接模拟,确定关键结合位点,以此为基础将单链抗体作为检测抗体,建立了间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法,对大米样品中Cry2Aa毒素进行了检测.利用生物信息学工具模拟获得单链抗体三维结构模型,分子对接结果显示重链可变区81Ny82和121SGNY124区域及轻链可变区的245YSSN248氨基酸残基在与毒素结构Ⅱ区识别过程中起关键作用,为建立高效检测方法奠定基础,进一步基于该单链抗体建立的时间分辨检测方法灵敏度(IC10)为0.08 ng/mL,中抑制浓度(IC50)为7.99 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.24～263.77 ng/mL,且与常规双抗夹心ELISA法检测呈良好线性关系.