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摘要:
目的 建立一种基于颜色判断结果的金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)快速、敏感和特异的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法并应用于食源性疾病样品的金葡菌筛查.方法 针对金葡菌耐热核酸酶(thermostable nuclease,nuc)基因特异性序列的6个区域设计2对引物,建立LAMP方法.利用LAMP和普通PCR方法同时检测金葡菌和对照组菌株来验证LAMP方法的特异性;将金葡菌菌液作10倍系列稀释后利用LAMP和PCR方法同时进行检测来评价两者的敏感度,利用LAMP和PCR方法分别对330份食源性疾病样品进行检测来比较两者的检出率.结果 LAMP方法可以利用肉眼进行结果判断,其特异性与普通PCR相当,但其敏感性比普通PCR高10倍,LAMP方法检测下限为10 cfu/ml,PCR方法检测下限为100 cfu/ml;LAMP和普通PCR方法对食源性疾病样品的检出率相符.结论 可视化金葡菌LAMP方法是一个快速、敏感和特异的方法,可应用于食源性疾病样品中金葡菌的筛查.
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文献信息
篇名 可视化金黄色葡萄球菌LAMP检测方法的建立及应用
来源期刊 现代预防医学 学科 医学
关键词 环介导等温扩增 金黄色葡萄球菌 耐热核酸酶
年,卷(期) 2017,(22) 所属期刊栏目 实验技术及其应用
研究方向 页码范围 4156-4159
页数 4页 分类号 R155.5
字数 语种 中文
DOI
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1 李莎 8 17 3.0 3.0
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节点文献
环介导等温扩增
金黄色葡萄球菌
耐热核酸酶
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现代预防医学
半月刊
1003-8507
51-1365/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-183
1975
chi
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