腺病毒载体携带标记基因EGFP转染人羊膜上皮细胞

• 作者: 刘小勇 徐玮 曹端荣 牛静宜 王乙婷 郝晓宁 金玲
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 腺病毒 绿色荧光蛋白 人羊膜上皮细胞 原代培养 扩增培养 基因转染 转染效率 细胞周期 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（21）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 3382-3387
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.21.017

摘要

背景:人羊膜上皮细胞具有干细胞的某些性能,可诱导分化为角膜样上皮细胞,但在体外培养时无法示踪,不能有效地监测其细胞转归.目的:探讨利用腺病毒载体将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞的可行性及感染效率.方法:pDC316-mCMV-EGFP腺病毒包装后,腺病毒载体携带标记基因EGFP转染体外培养的人羊膜上皮细胞,并扩增培养,观察转染后人羊膜上皮细胞与未转染人羊膜上皮细胞的形态差异,并在荧光显微镜下观察转染基因的表达,用流式细胞仪检测转染细胞的细胞周期及EGFP阳性表达率.结果与结论:①多数转染细胞筛选出的抗性克隆以及培养的克隆细胞与正常体外培养的人羊膜上皮细胞在形态上无显著差异;②瞬时转染后48 h的人羊膜上皮细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达率最高达99.01%;③转染后的人羊膜上皮细胞的细胞周期有所减慢,说明利用腺病毒载体能将标记基因EGFP转染入人羊膜上皮细胞,可更直观地观察到人羊膜上皮细胞在体外的进一步转归.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小勇	暨南大学附属第一医院眼科	26	130	6.0	11.0
2	曹端荣	深圳市宝安人民医院眼科	6	10	2.0	2.0
3	金玲	深圳市宝安人民医院眼科	10	40	4.0	5.0
4	王乙婷	深圳市宝安人民医院眼科	3	12	2.0	3.0
5	徐玮	暨南大学附属第一医院眼科	3	26	3.0	3.0
6	郝晓宁	深圳市宝安人民医院眼科	1	4	1.0	1.0
7	牛静宜	深圳市宝安人民医院眼科	5	22	3.0	4.0