抗人CD4单克隆抗体制备及其抗HIV-1功能鉴定

• 作者: 刘巍 史宣玲 李家伟 李岚 殷昌斌 江立玮
• 来源期刊: 中国病毒病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒I型 CD4 DNA免疫 多克隆抗体 单克隆抗体 中和抗体
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 艾滋病专题 论著
• 页码范围: 194-199
• 页数: 6页
• 分类号: R512.91
• 语种: 中文
• DOI: 10.16505/j.2095-0136.2018.0053

摘要

目的 制备具有抗HIV-1功能的抗人CD4单克隆抗体.方法 构建人CD4真核表达质粒pcDNA3.1-hCD4,将该质粒DNA免疫BALB/c小鼠.免疫前血清作为阴性对照,通过HIV-1假病毒中和实验和ELISA方法检测多克隆抗体血清.通过杂交瘤技术制备鼠抗CD4单克隆抗体,HIV-1假病毒中和实验进行筛选.通过不同亚型假病毒中和实验和CD4 D1D2蛋白ELISA方法分别检测腹水纯化单克隆抗体的中和活性和特异性结合力.结果 DNA免疫后第6周的多抗血清100倍稀释后对HIV-1假病毒的抑制率可达75％,第8周其抑制率可上升至95％.CD4 D1D2蛋白ELISA结果显示,免疫后第4周多抗血清就显示出同CD4蛋白较强的特异性结合.共获得160余株对HIV-1假病毒B’、BC、AE亚型具有中和活性的单克隆抗体.选择其中中和活性较高的8株制备纯化腹水单抗,其中5株单抗IC50小于130 μg/ml.ELISA检测结果显示腹水纯化单抗与CD4 D1D2蛋白可以特异性结合.结论 获得了具有抗HIV-1假病毒的抗CD4单克隆抗体.具有HIV-1广谱中和活性的抗CD4抗体可用于研发有效的被动免疫制剂,控制艾滋病传播.