甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 EGF片段多克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 张培星 李涓 窦倩倩 贾晓晖
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 表皮生长因子功能区 多克隆抗体 琼脂双扩散法 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2018.02.004

摘要

目的 制备甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL-associated serine protease-2,MASP-2)EGF功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定,为后续研究奠定基础.方法 利用带有EGF基因片段的pGEX-6P-2原核载体诱导表达GST-EGF融合蛋白,并采用商品化GST-Beads进行纯化;将纯化的融合蛋白作为抗原,与弗氏完全佐剂充分混合后,免疫5周龄BALB/c雌性健康小鼠,制备多克隆抗体;利用琼脂双扩散法检测多克隆抗体的效价,并进一步应用Western blot鉴定多克隆抗体的特异性及效价.结果 成功表达并纯化EGF蛋白,以此成功制备出特异性强的GST-EGF融合蛋白的多克隆抗体,与其他蛋白无交叉反应;琼脂双扩散法检测的EGF抗体效价为1∶8;Western blot检测的EGF抗体效价大于1∶2 000.结论 成功制备出具有特异性强且效价高的GST-EGF蛋白的多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李涓	河北省沧州中西医结合医院实验诊断科	7	8	2.0	2.0
2	贾晓晖	河北北方学院医学检验学院病原生物与免疫学研究所免疫学教研室	31	57	5.0	6.0
3	张培星	河北省沧州中西医结合医院实验诊断科	1	0	0.0	0.0
4	窦倩倩	河北省沧州中西医结合医院实验诊断科	1	0	0.0	0.0