新型竹鼠源阿卡斑病毒RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘金凤 吴健敏 唐海波 彭可可 白安斌 陈凤莲
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 竹鼠 阿卡斑病毒 检测 反转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.12.006

摘要

为了建立新型竹鼠源阿卡斑病毒RT-PCR的检测方法,通过对新型竹鼠源阿卡斑病毒(Aka-bane virus,AKAV)及其同属各病毒基因序列进行比对分析,设计了针对AKAV M基因片段的一对特异性引物,经优化建立AVKV的RT-PCR检测方法.结果表明,在57℃退火温度条件下,于3 h内可完成目的片段扩增,目的片段大小为816 bp;该方法能特异性地扩增新型竹鼠源AKAV,不能扩增竹鼠细小病毒、竹鼠圆环病毒、竹鼠内源性反转录病毒、竹鼠乳酸脱氢酶增高病毒;检验敏感性高,灵敏度可达23 pg.对感染发病竹鼠样品的检测结果显示,本方法特异准确,能清楚分辨发病竹鼠不同组织中病毒核酸丰度.说明建立的RT-PCR方法简单特异、灵敏度高,不仅适用于实验室鉴定,还可应用于口岸、野外等的临床监测.