猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用

• 作者: 刘忠梅 张体银 李丹丹 杨俊兴 王绥家 陈平亚 高慎阳
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猴免疫缺陷病毒 SIV30蛋白 免疫梳 快速检测方法 抗体
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 217-223
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 5327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2018.02.013

摘要

目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的 SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG.方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测.结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的IC均能够特异性检测到相应的SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30蛋白能够敏感地检测到1:400倍稀释的SIV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,IC与ELISA检测结果一致率为100.0%,Kappa=1.000.结论 原核表达了SIV30蛋白,制备了IC,并应用于临床检测.该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高慎阳	辽宁医学院畜牧兽医学院	51	336	9.0	16.0
2	刘忠梅	黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心	20	113	7.0	8.0
3	张体银	福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心	31	267	8.0	15.0
4	李丹丹	海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	41	185	8.0	10.0
5	杨俊兴	深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心	8	40	3.0	6.0
6	王绥家	海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	10	28	4.0	5.0
7	陈平亚	海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心	2	5	1.0	2.0