鼠痘病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

• 作者: 周洁 胡建华 赵丽娟 陶凌云 高诚
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 鼠痘病毒(ECTV) 环介导等温扩增技术(LAMP) 实时 快速检测
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 343-349
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4315字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2018.05.004

摘要

目的 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立一种鼠痘病毒(ECTV)的可视化快速检测方法.方法 通过序列分析选择3段ECTV序列保守区域设计了9套LAMP引物,利用LAMP Real Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物组合,优化反应条件,建立了对ECTV核酸进行特异性扩增的LAMP检测方法,并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果.对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估,并对人工感染样品进行了检测.结果 该方法在63℃恒温下作用60 min,ECTV DNA获得了高效特异性扩增,与其余常见小鼠病毒无交叉反应;最低检出量为530 fg/μL,是常规PCR的103倍,加入目测荧光染料判断结果与Real Time Turbidimeter LA-320仪监测结果一致.结论 建立的ECTV LAMP检测方法具有快速、特异、灵敏和操作简单的特点,或具有良好应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高诚		61	229	7.0	12.0
2	胡建华		55	297	7.0	15.0
3	周洁		19	51	5.0	6.0
4	陶凌云		14	15	2.0	3.0
5	赵丽娟		4	8	1.0	2.0