miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建

• 作者: 常利红 张革化 王君 赖晓萍 陈晓红 黄健聪 黄子真
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: miR-18a 慢病毒 过表达载体 抑制载体 鼻咽癌细胞
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 技术研究
• 页码范围: 119-129
• 页数: 11页
• 分类号: R766.3
• 字数: 4156字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础.[方法]将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定.[结果]成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×108TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调.[结论]成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张革化	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	93	510	12.0	17.0
2	王君	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	16	41	4.0	6.0
3	陈晓红	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	51	234	8.0	13.0
4	常利红	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	12	41	4.0	6.0
5	黄子真	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	12	59	4.0	7.0
6	黄健聪	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	15	68	5.0	7.0
7	赖晓萍	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	2	1	1.0	1.0