青稞核糖体蛋白基因HbRPL19的克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 原红军 尼玛扎西 徐齐君 扎桑 曾兴权 王玉林
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 青稞 核糖体蛋白 RPL19 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 1111-1115
• 页数: 5页
• 分类号: S512.3
• 字数: 3425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.6.003

摘要

[目的]克隆青稞核糖体蛋白基因HbRPL19,分析其序列特征并在大肠杆菌中诱导目的蛋白,为后续的研究奠定基础.[方法]根据鉴定得到的青稞HbRPL19的序列设计了引物,从青稞叶片的cDNA中扩增得到目的片段,并对目的基因序列进行了测序鉴定和序列分析,同时构建了原核表达载体pET28a-RPL19,转化入大肠杆菌BI21(DE3)后利用IPTG诱导外源蛋白质表达并检测.[结果]成功扩增出了青稞核糖体蛋白基因HbRPL19的CDS全长序列,大小为654 bp.根据生物信息学分析的结果,HbRPL19编码的蛋白质含有217个氨基酸,相对分子质量为24.47 KD,理论等电点(pI)为10.42,总平均亲水性(GRAVY)为-0.353,不稳定系数为53.46,存在典型的SH3-like结构域和核糖体蛋白L19结构域.系统进化分析表明,HbRPL19与小麦和山羊草的RPL19具有较近的亲缘关系.蛋白表达结果显示,重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中.[结论]获得了青稞抗寒相关基因HbR-PL19的序列和蛋白.