黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响

• 作者: 严婷婷 唐晓倩 张奇 张文 李培武 陈永勤
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄曲霉毒素M1 人工抗原 抗原鉴定 偶联比 ELISA
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 测试与加工
• 页码范围: 426-431
• 页数: 6页
• 分类号: S379.7
• 字数: 3584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2018.03.016

摘要

为提高黄曲霉毒素的检测灵敏度,探明黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响.采用黄曲霉毒素M1与羧甲氧基羟氨半盐酸盐进行肟化反应生成半抗原,再经活泼脂法,将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)脱水反应实现偶联,生成自制人工抗原AFM1-BSA.采用竞争ELISA法、荧光与紫外光谱法鉴定,结果均证明自制人工抗原AFM1-BSA合成成功.进一步通过摩尔消光系数测算得AFM1的自制和商业抗原偶联比分别为0.7和6.3,自制抗原偶联比仅是商业抗原的1/9,二者偶联方法相同,但偶联比差异显著,为进一步研究比较提供了可能.将自制人工抗原AFM1-BSA和商业抗原AFM1-BSA分别与实验室自制的系列黄曲霉毒素单抗1C11、2C9、LM13、LM47反应,结果显示四种抗体对商业抗原均有很高的灵敏度,只有2C9对自制人工抗原有较高的灵敏度(1.997ng/mL),明显低于商业抗原作为包被抗原与2C9反应时的灵敏度(0.047ng/mL),说明针对同一种毒素AFM1制备的抗体,高偶联比抗原有助于提高免疫分析灵敏度.研究结果为AFM1高灵敏免疫检测技术研究提供了科学依据.