嗜水气单胞菌十一碳焦磷酸合成酶XreF的原核表达及分离纯化

• 作者: 刘艳菊 张贺航 桂瑞英 王路路 苏晓燕 许永斌 陈金利 黄丽菲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 十一碳焦磷酸合成酶XreF 基因克隆 分离纯化
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 752-758
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 3990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2018.06.006

摘要

目的:构建嗜水气单胞菌十一碳焦磷酸合成酶XreF基因的原核表达载体,转入大肠杆菌诱导表达高活性的XreF蛋白.方法:从嗜水气单胞菌中提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增,构建pPROEX-HTa-XreF重组载体,转入大肠杆菌BL21(DE3)表达目的蛋白;用镍离子亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析分离纯化目的蛋白XreF;用分析型凝胶过滤柱检测XreF的聚集状态.结果:构建了重组载体pPROEX-HTa-XreF,测序结果与XerF基因编码序列一致;XreF蛋白在大肠杆菌中经IPTG诱导高效表达,纯化获得高浓度(17.5 mg/mL)、高纯度(96％以上)的XreF蛋白;分析型凝胶过滤结果显示,XreF在溶液中为单体,在镁离子存在的情况下为二聚体.结论:获得并纯化了在大肠杆菌中高效表达的嗜水气单胞菌XreF,镁离子可诱导XreF在溶液中由单体向二聚体转化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许永斌	大连民族大学生命科学学院	20	42	4.0	6.0
2	王路路	大连民族大学生命科学学院	6	0	0.0	0.0
3	陈金利	大连民族大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
4	刘艳菊	大连民族大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	苏晓燕	大连民族大学生命科学学院	2	7	1.0	2.0
6	黄丽菲	大连民族大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
7	桂瑞英	大连民族大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
8	张贺航	大连民族大学生命科	1	0	0.0	0.0