利用CRISPR/Cas9技术制备ApoE-/-兔

• 作者: 卢瑶瑶 周敏雅 孙雨婷 张婷 成勇 梁景岩 王梦恬 胡艳华 袁婷婷 钟港 陆睿 黄俊杰
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 栽脂蛋白E 基因敲除 规律成簇间隔短回文重复序列 新西兰兔 血脂
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: RCT专栏
• 页码范围: 658-665
• 页数: 8页
• 分类号: R-332
• 字数: 5580字
• 语种: 中文

摘要

目的 制作载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE-/-)兔,为研究动脉粥样硬化提供优良动物模型.方法 应用CRISPR/Cas9系统编辑新西兰兔的ApoE基因,制作F0代ApoE-/-兔,利用PCR、TA克隆、Sanger测序、Western blot和血脂检测鉴定ApoE靶向敲除的效率和效果,并通过传代获得ApoE+/-兔.结果 Sanger测序结果显示成功靶向敲除兔ApoE基因,血清脂蛋白含量在正常饮食状态下相对于野生型兔有升高,且可稳定遗传.结论 成功建立了ApoE-/-兔,为进一步研究动脉粥样硬化和其他相关疾病提供了良好的动物模型.