磷酸水解酶对大肠杆菌工程菌合成番茄红素的影响

• 作者: 刘洋洋 张翀 王天民 薛正莲 邢新会 郭佳慧
• 来源期刊: 安徽工程大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 大肠杆菌DH1 番茄红素 磷酸水解酶基因 CRISPRi Golden-Gate
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 生物与食品科学
• 页码范围: 1-5,42
• 页数: 6页
• 分类号: TQ28
• 字数: 2882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0977.2018.04.001

摘要

实验以大肠杆菌DH1为宿主菌,在已有生产番茄红素大肠杆菌工程初始菌株lyc001的基础上,增加合成番茄红素途径中的关键基因crtEIB拷贝数;表征结果表明,相较于初始菌lyc001,番茄红素产量提高了34％,并将此菌命名为lyc011.利用CRISPR干扰(CRISPR interference,CRISPRi)原理以及Golden-Gate组装方法成功构建了可以靶向得到的57个磷酸水解酶基因的双single guide RNA(sgRNA)的质粒.将dCas9质粒和sgRNA表达质粒导入lyc011菌株中,通过下调这57个磷酸水解酶基因表达量,最终通过发酵表征成功筛选到了15个对番茄红素产量提高具有正向调节结果的磷酸水解酶基因,分别为:y j jG,aphA,nagD,yqaB,yidA,p phA,bacA,glpQ,pgpB,spoT,cpdB,nudJ,dgt,phoQ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张翀	清华大学化学工程系生物化工研究所	23	432	8.0	20.0
5	薛正莲	安徽工程大学生物与化学工程学院	152	710	15.0	17.0
6	王天民	清华大学化学工程系生物化工研究所	3	5	1.0	2.0
7	刘洋洋	安徽工程大学生物与化学工程学院	1	0	0.0	0.0
8	郭佳慧	清华大学化学工程系生物化工研究所	1	0	0.0	0.0