UⅡ/UT系统对LPS刺激枯否细胞TRAF6和ROS表达以及自噬与凋亡的影响

• 作者: 何玉 刘亮明 徐国荣 施青青 杨雪 柴莉丽 谢平 钟欢
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: urotensinⅡ 枯否细胞 脂多糖 肿瘤坏死因子受体相关因子6 活性氧簇 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-216
• 页数: 6页
• 分类号: R575.3
• 字数: 4277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2018.04.005

摘要

目的 在分析urotensin(UⅡ)/urotensinⅡreceptor(UT)系统对LPS(lipopolysaccharide)刺激枯否细胞(Kupffer cell,KC)肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF6)表达和活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)释放效应的基础上,探讨该系统对细胞自噬和凋亡的影响.方法 采用胶原酶灌注、 不连续密度梯度离心和选择性贴壁等方法分离培养SD大鼠原代KC.将其随机分为A组:LPS(-)urantide(-);B组:LPS(-)urantide(+);C组:LPS(+)urantide(-);D组:LPS(+)urantide(+).细胞mRNA和蛋白质表达分别采用real-time PCR和Western印迹检测,ROS水平采用2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)试剂盒检测.结果 细胞TRAF6 mRNA、TRAF6蛋白、ROS含量、LC3 mRNA、LC3-Ⅱ蛋白和p62 mRNA相对表达水平均为C组较A组和B组高,D组较C组低(均为P<0.01);P62蛋白、CLEAVED CASPASE-3蛋白相对表达水平均为C组较A组和B组高,D组较C组高(均为P<0.01).此外,BCL-2蛋白相对表达水平为C组较A组和B组低,D组较C组低(均为P<0.01).以上差异均有显著统计学意义.结论 UⅡ/UT系统介导LPS刺激KC炎症和氧化应激反应可能与细胞自噬增强和凋亡抑制有关.