新城疫强毒株荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用

• 作者: 于松梅 刘华雷 单虎 吕艳 左媛媛 张乐萃 王志亮 王静静 罗瑶瑶 赵云玲 郑东霞 魏润宇
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒(NDV) 强毒 荧光定量RT-PCR ROC曲线
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 动物病毒研究论著
• 页码范围: 541-549
• 页数: 9页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

基于国内流行的新城疫病毒强毒株F蛋白裂解位点分子特征设计特异性引物及Taqman探针,建立了一种可检测新城疫强毒株的一步法实时荧光定量RT-PCR方法.通过体外转录法制备cRNA标准品作为阳性模板制作标准曲线以及临床样品的检测绘制出ROC曲线,对诊断指标进行系统评价.结果显示:该方法的标准曲线为Y=-3.390X+38.23,相关系数R2为0.9999;灵敏度试验显示,该方法的最低检测限为2拷贝/μL,比常规RT-PCR高10倍;特异性试验显示该方法与常见禽病病毒无交叉反应;重复性试验的组内和组间的变异系数分别低于1％和1.5％.通过检测1 974份临床样品绘制ROC曲线显示,ROC曲线下面积为0.9861,当Youden Index为93.12时,cutoff值设为35,诊断的敏感性和特异性分别为94.82％、98.3％,与病毒分离方法的Kappa系数为0.919.本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好、诊断准确性极好,给实验室提供一种快速、实用的检测临床样品的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘华雷		49	216	7.0	13.0
2	郑东霞		16	73	4.0	8.0
3	赵云玲		17	83	4.0	9.0
4	王志亮		134	936	18.0	25.0
5	王静静		17	93	4.0	9.0
6	罗瑶瑶		1	0	0.0	0.0
7	吕艳		6	15	1.0	3.0
8	魏润宇		1	0	0.0	0.0
9	于松梅		2	0	0.0	0.0
10	左媛媛		2	0	0.0	0.0
11	张乐萃		1	0	0.0	0.0
12	单虎		1	0	0.0	0.0