miR-17-5p靶向MICB减弱NK细胞对肝癌细胞的毒性作用

• 作者: 余淼 徐建 王佳佳 申权 薛焕洲 贾江坤 贾萌
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 HepG2细胞 自然杀伤细胞 miR-17-5p 主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因B
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 1776-1782
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 字数: 5508字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2018.12.004

摘要

目的:探讨miR-17-5p在肝细胞癌(HCC) HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性中的调控作用.方法:使用含野生型MICB基因3'UTR序列、突变型MICB基因3'UTR序列、miR-17-5p mimic序列、miR-17-5p-NC序列、anti-miR-17-5p序列的质粒载体分别或共转染HCC HepG2细胞,使用丙戊酸钠处理转染或未转染细胞.应用荧光素酶活性测定检测miR-17-5p对MICB的调控作用.应用实时荧光定量PCR或蛋白免疫印迹检测细胞或组织中miR-17-5p及MICB mRNA和蛋白表达情况.结果:①与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平显著升高,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平均显著降低,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P＜0.05).与miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Wt组相比,miR-17-5 p-mimic+MICB 3'-UTR-Wt组荧光素酶活性显著降低(P＜0.05).miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Mut组与miR-17-mimic+MICB 3'-UTR-Mut组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P＞0.05).②与对应癌旁非肿瘤组织相比,miR-17-5p在HCC组织中的表达水平显著增加,而MICB蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).miR-17-5p和MICB蛋白的表达与肿瘤直径、远处转移、TNM分期、分化程度等临床病理特征有关(P＜0.05).在HCC肿瘤组织中miR-17-5p与MICB蛋白表达水平呈明显负相关(P＜0.05).③与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组MICB蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).与miR-17-5p-mimic+MICB 3'UTR-Mut组相比,miR-17-5p-mimic+MICB-3'UTR-Wt共转染组中NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均＜0.05).与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17组NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均＜0.05).④与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组细胞中MICB表达水平显著降低(P＜0.05).在不同效靶比时,与Ctrl组相比,丙戊酸钠组NK细胞毒性显著增加(P＜0.05).与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性显著降低(P＜0.05).结论:miR-17-5p通过靶向MICB降低HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性,从而抑制NK细胞对肝癌细胞的毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛焕洲	河南省人民医院肝胆外科	52	183	7.0	10.0
2	申权	河南省人民医院肝胆外科	30	161	7.0	11.0
3	余淼	河南省人民医院肝胆外科	8	39	4.0	6.0
4	贾江坤	河南省人民医院肝胆外科	3	8	2.0	2.0
5	贾萌	河南省人民医院肝胆外科	5	19	2.0	4.0
6	王佳佳	河南省人民医院肝胆外科	1	1	1.0	1.0
7	徐建	河南省人民医院肝胆外科	1	1	1.0	1.0