miR-17-5 p通过靶向抑制MICB表达降低肝癌细胞对NK细胞杀伤的敏感性

• 作者: 姚向庆 张志波 李国平 杨兰钫
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 HepG2细胞系 自然杀伤细胞 miR-17-5p 主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因B
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 858-864
• 页数: 7页
• 分类号: R392
• 字数: 6114字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.07.018

摘要

目的:探讨miR-17-5p在HCC细胞系HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性中的调控作用.方法:使用含野生型MICB基因3′UTR序列、突变型MICB基因3′UTR序列、miR-17-5p mimic序列、miR-17-5p-NC序列、anti-miR-17-5p序列的质粒载体分别或共转染HCC细胞系HepG2,使用丙戊酸钠处理转染或未转染细胞.应用荧光素酶活性测定检测miR-17-5p对MICB的调控作用.应用实时荧光定量PCR检测细胞或组织中miR-17-5p及MICB mRNA表达情况,利用蛋白免疫印迹法检测MICB蛋白表达情况.对比转染质粒后各组细胞中miR-17-5p和MICB mRNA及蛋白的表达情况,分析TargetScan预测和荧光素酶活性测定结果、miR-17-5p与MICB蛋白在HCC组织中的表达及与临床病理特征的关系、miR-17-5p与MICB蛋白在HCC组织中表达的相关性,并对比各组MICB蛋白表达和NK细胞介导的细胞毒性、丙戊酸钠各组NK细胞毒性.结果:①与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平较高,MICB mRNA和蛋白表达水平均较低(P<0.05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平均较低,MICB mRNA和蛋白表达水平均较高(P<0.05);与miR-17-5p-NC+MICB 3′UTR-Wt组相比,miR-17-5p-mimic+MICB 3′-UTR-Wt组荧光素酶活性较低(P<0.05).miR-17-5p-NC+MICB 3′UTR-Mut组与miR-17-mimic+MICB 3′-UTR-Mut组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05).②与对应癌旁非肿瘤组织相比,miR-17-5p在HCC组织中的表达水平较高,而MICB蛋白表达水平较低(P<0.05).miR-17-5p和MICB蛋白的表达与肿瘤直径、远处转移、TNM分期、分化程度等临床病理特征有关(P<0.05).在HCC肿瘤组织中miR-17-5p与MICB蛋白表达水平呈明显负相关(P<0.05).③与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性、MICB蛋白表达水平均较低(P<0.05);与miR-17-5p-mimic+MICB 3′UTR-Mut组相比,miR-17-5p-mimic+MICB-3′UTR-Wt共转染组中NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均较高(P<0.05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组NK细胞毒性和MIBC蛋白表达均较高(P<0.05).④与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组细胞中MICB表达水平较低(P<0.05).在不同效靶比时,与Ctrl组相比,丙戊酸钠组NK细胞毒性较高(P<0.05).与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性较低(P<0.05).结论:miR-17-5p通过靶向MICB降低HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性,从而抑制NK细胞对肝癌细胞的毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志波		16	59	5.0	7.0
2	李国平		19	48	4.0	6.0
3	姚向庆		4	9	1.0	2.0
4	杨兰钫		1	1	1.0	1.0