尼罗罗非鱼Xbp1-S基因克隆及表达分析

• 作者: 丁明媚 付胜利 叶剑敏 尹晓雪 王玉红 郭政 陈萌
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 尼罗罗非鱼 Xbp1-S 基因克隆 组织表达 无乳链球菌
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 73-82
• 页数: 10页
• 分类号: S917
• 字数: 7178字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11758/yykxjz.20170123001

摘要

为了了解尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)细胞转录因子Xbp1-S(OnXbp1-S)的基因序列特征及其在无乳链球菌(Streptococcus alactolyticus)应激和在B细胞分化中的作用,应用RACE克隆技术获得的OnXbp1-S基因全长1380 bp,包括开放阅读框ORF为1155 bp,5'端非编码区(5'UTR)长127 bp,3'端非编码区(3'UTR)长98 bp.OnXbp1-S序列分析推测该基因编码384个氨基酸,分子量为41.32 kDa,理论等电点为4.36.同源性分析显示,OnXbp1-S基因与其他鱼类的聚为一支,其中,与南极鳕(Notothenia coriiceps)相似性最高.荧光定量PCR及Western-blot结果显示,OnXbp1-S在各组织中均有表达,mRNA水平上在肝脏中表达量最高,蛋白水平上在胸腺中表达量最高,而在肌肉中表达量最低.无乳链球菌应激后,OnXbp1-S基因在肝脏和脾脏中的表达趋势相似,均在应激期间出现表达量上调,在192 h出现峰值.另外,免疫组化分析发现,OnXbp1-S因子在不同分化程度B细胞亚类中的表达呈现差异,在成熟B细胞中呈现高表达,而在未成熟B细胞中几乎不表达.研究结果表明,OnXbp1-S参与尼罗罗非鱼对无乳链球菌的免疫防御,和在B细胞分化中起作用.本研究将为进一步研究OnXbp1-S因子应答病原菌侵染的机理及促进B细胞分化机制提供理论依据.