腾冲嗜热厌氧菌丙氨酸消旋酶底物通道氨基酸位点的功能

• 作者: 何广正 徐书景 赵宝华 鞠建松 韩卿卿
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 丙氨酸消旋酶 底物通道 保守氨基酸位点 定点突变 酶学特性
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1397-1406
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20170430

摘要

[目的]通过定点突变探究腾冲嗜热厌氧菌MB4中生物合成型丙氨酸消旋酶TtAlr底物通道内氨基酸位点A172和S173的功能.[方法]利用定点突变PCR技术构建突变体,通过亲和层析法纯化酶蛋白,采用D-氨基酸氧化酶偶联法检测各突变蛋白的活性及其稳定性.[结果]通过定点突变PCR成功得到8个突变体,酶学特性分析发现,A172位点突变为丝氨酸(S)后酶蛋白的相对活性有所提升,但含有该位点突变的酶蛋白稳定性均大幅下降;S173位点突变为天门冬氨酸(D)后导致突变体蛋白的最适反应温度提升了15℃,半衰期大幅延长,但相对活性明显下降.[结论]丙氨酸消旋酶TtAlr底物通道内A172和S173位点均是影响酶蛋白催化活性和稳定性的关键位点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝华	河北师范大学生命科学学院	238	1801	20.0	28.0
2	徐书景	河北师范大学生命科学学院	22	63	5.0	6.0
6	鞠建松	河北师范大学生命科学学院	25	67	5.0	6.0
7	韩卿卿	河北师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
8	何广正	河北师范大学生命科学学院	9	17	3.0	4.0