二十碳五烯酸通过抑制MGMT表达提高胶质瘤U87细胞对替莫唑胺的化疗敏感性

• 作者: 刘楚斌 胡伟鹏 陈祥荣 高延磊 黄天造
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 二十碳五烯酸 替莫唑胺 DNA错配修复酶 核因子KB
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 神经胶质瘤
• 页码范围: 879-885
• 页数: 7页
• 分类号: R730.264
• 字数: 5440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2018.09.003

摘要

目的 探讨二十碳五烯酸(EPA)对胶质瘤U87细胞替莫唑胺(TMZ)化疗敏感性的影响及其机制. 方法 (1)体外常规培养U87细胞,加入0、25、50、100、200 μmol/L EPA分别作用12、24、48 h后MTT检测细胞增殖率;(2)将U87细胞分为对照组、EPA组、TMZ组、EPA+TMZ组(EPA、TMZ的浓度分别为25、100 mol/L,EPA预处理时间为12、24或48 h,TMZ作用时间为24 h),MTT检测4组细胞的增殖抑制率;(3)将U87细胞分为对照组、EPA组、TMZ组、EPA+TMZ组(EPA、TMZ的浓度分别为25、100 mol/L,作用时间分别为12、24h).流式细胞术检测4组细胞凋亡率;Western blotting检测细胞活化半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,DNA错配修复酶(MGMT)及核因子κB(NF-κB) p65、NF-κB抑制蛋白(IKBα)的表达;免疫荧光染色检测细胞MGMT和NF-κB p65的表达;甲基化特异性PCR(MSP)法检测细胞MGMT基因启动子甲基化水平. 结果 (1)50、100、200μmol/L EPA作用12、24、48h时对U87细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性;(2)与同样预处理时间的TMZ组比较,EPA+TMZ组U87细胞的增殖抑制率均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)流式细胞术检测显示:与TMZ组[(34.58±4.35)％]比较,EPA+TMZ组U87细胞的凋亡率[(53.28±5.05)％]明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);Western blotting检测显示:与TMZ组比较,EPA+TMZ组U87细胞活化caspase-3、Bax和IKBα蛋白表达升高,MGMT和NF-κB p65蛋白表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫荧光染色显示EPA+TMZ组细胞MGMT和NF-κB p65蛋白的表达低于TMZ组;MSP检测显示EPA+TMZ组U87细胞MGMT基因启动子甲基化水平高于TMZ组. 结论 EPA预处理可提高胶质瘤U87细胞对TMZ的化疗敏感性,其机制可能是通过下调NF-κB信号通路抑制MGMT表达来实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈祥荣	福建医科大学附属第二医院神经外科	34	174	8.0	12.0
2	黄天造	福建医科大学附属第二医院神经外科	16	42	4.0	5.0
3	胡伟鹏	福建医科大学附属第二医院神经外科	26	156	6.0	11.0
4	高延磊	福建医科大学附属第二医院神经外科	4	2	1.0	1.0
5	刘楚斌	福建医科大学附属第二医院神经外科	1	1	1.0	1.0