金鱼卵黄原蛋白单抗夹心ELISA的开发及其在环境雌激素检测中的应用

• 作者: 单瑞后 张振忠 汝少国 王军 马淑伟
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 地球科学
• 关键词: 金鱼 卵黄原蛋白 单克隆抗体 ELISA 环境雌激素
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 59-65
• 页数: 7页
• 分类号: X503
• 字数: 4131字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20170056

摘要

利用Western blot和ELISA方法,从实验室现有的斑马鱼(Danio rerio)卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin,Lv)单克隆抗体库中筛选出了对金鱼(Carassius auratus)卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vtg)具有高特异性、高亲和力的单抗H3A8.以纯化的单抗H3A8、金鱼Lv与HRP标记的Lv多克隆抗体建立了夹心ELISA,其工作范围为15.6～1 000 ng·mL-1,检出限为9.6ng·mL-1,组内差异与组间差异分别为1.30％～4.99％和2.30％～4.37％,并且金鱼Vtg与Lv的标准曲线几乎重合,表明建立的夹心ELISA可以准确定量金鱼Vtg,并利用建立的ELISA测定了10、100、1 000 ng/L 17p雌二醇(17β-estradiol,E2)暴露3和21 d后雄性金鱼血浆与体表粘液中的Vtg含量,发现1 000 ng·L-1 E2暴露3d、100与1 000ng·L-1 E2暴露21 d均能显著升高雄鱼血浆和体表粘液中的Vtg含量,E2暴露21 d后雄鱼血浆与体表粘液中的Vtg含量较为接近,建议将取样简便且对鱼体无伤害的体表粘液用作今后金鱼Vtg的检测样品.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汝少国	中国海洋大学海洋生命学院	85	802	15.0	24.0
2	王军	中国海洋大学海洋生命学院	18	100	6.0	9.0
3	张振忠	中国海洋大学海洋生命学院	3	1	1.0	1.0
4	单瑞后	中国海洋大学海洋生命学院	2	1	1.0	1.0
5	马淑伟	中国海洋大学海洋生命学院	2	1	1.0	1.0