食品检验用标准菌株分子水平质控方法的建立与应用

• 作者: 叶强 孙文媛 徐潇 李康 梁丽 王春娥 石继春 陈翠萍
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 生物学
• 关键词: 标准菌株 分子水平质控方法 脉冲场凝胶电泳 多位点序列分型 食品检验
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 744-752
• 页数: 9页
• 分类号: Q93-331
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2018.09.011

摘要

目的 建立食品检验用标准菌株分子水平质控方法,并进行应用.方法 使用16S rRNA基因序列分析、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型等分子生物学技术手段,对食品安全国家标准中使用的标准菌株进行分子确认,并对不同的批号进行验证.结果 16S rRNA基因序列比对结果符合该菌株所在的菌属,并获得标准菌株16S rRNA基因标准序列,不同批号的标准菌株16S rRNA基因序列完全一致;确定了每株标准菌株的ST型和基因型,并对不同批号的菌株进行了基因型比较,未发现型别改变;对无PulseNet标准操作方法的菌株,开展方法学研究,获得了最适用的限制性内切酶和电泳参数,建立了标准菌株分子指纹图谱,比较不同批号菌株的PFGE图谱,相似性均为100％.结论 本研究首次将分子生物学技术应用到标准菌株的质量控制,突破了使用传统质控方法的瓶颈,从分子水平实现对标准菌株稳定性的评价,保证了标准菌株在食品检验过程中的稳定性和一致性.