金黄色葡萄球菌fnbA和fnbB基因及fnbAB双基因缺失突变体菌株的构建

• 作者: 冯洒然 姜淑娟 徐力 李德志 林殿杰 梁斌 邵杨
• 来源期刊: 徐州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 fnbA fnbB fnbAB 基因敲除
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 512-518
• 页数: 7页
• 分类号: R563.1
• 字数: 4409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2018.08.004

摘要

目的 构建纤维连接蛋白结合蛋白(fibrinogenbinding proteins,FnbP)基因fnbA 、fnbB及fnbAB基因敲除质粒并构建相应基因缺失金黄色葡萄球菌菌株.方法 提取金黄色葡萄球菌NCTC8325菌株的基因组,以合成的含有GGGG-attB1的基因特异性序列为引物,采用聚合酶链式反应(PCR)技术分别扩增目的基因片段,应用Gateway基因克隆技术,通过BP反应与含有attP1和attP2的pKOR1质粒载体混合,在attB和attP之间发生位点特异性重组,构建成含有fnbA fnbB和fnbAB基因敲除质粒,再电转到金黄色葡萄球菌菌株NCTC8325.结果 构建质粒pKOR1dfnbA、pKOR1dfnbB和pKOR1dfnbAB经PCR验证并测序结果正确,经PCR验证,基因缺失质粒pKOR1dfnbA、pKOR1dfnbB和pKOR1dfnbAB均成功电转入金黄色葡萄球菌NCTC8325菌株.结论 成功构建fnbA、fnbB和fnbAB基因敲除金黄色葡萄球菌菌株NCTC8325,为研究FnBPA和FnBPB在金黄色葡萄球菌感染机制中的作用提供了有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜淑娟	山东大学附属省立医院呼吸与重症医学科	60	344	10.0	15.0
2	林殿杰	山东大学附属省立医院呼吸与重症医学科	31	182	9.0	12.0
3	邵杨	山东大学附属省立医院呼吸与重症医学科	9	37	3.0	6.0
4	梁斌	山东大学附属省立医院呼吸与重症医学科	11	22	3.0	4.0
5	冯洒然	山东省千佛山医院血液科	3	4	1.0	2.0
6	徐力	山东大学附属省立医院呼吸与重症医学科	1	0	0.0	0.0