牛、羊肉中水貂、猪、鼠混杂成分的多重荧光PCR鉴定方法的建立

• 作者: 任金瑞 刘艳艳 张全芳 步迅 胡悦 范阳阳 陈蕾 陈雪燕
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 多重实时荧光PCR 源性鉴定 水貂、猪和鼠源性成分
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1621-1630
• 页数: 10页
• 分类号: S872|Q7|Q751
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.09.016

摘要

针对现阶段肉类食品市场中出现的以劣充优的掺假问题,通过视觉、触觉、嗅觉和味觉等传统方法来鉴定肉的外观、色泽、气味和硬度,已不能满足现阶段肉类质量和源性的鉴别要求.基于现代分析仪器和生物技术的肉类掺假识别方法主要包括:基于蛋白质的检测方法、酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、色谱分析方法和基于DNA序列的分子生物学检测方法.其中,基于DNA序列的分子生物学检测方法特别是荧光PCR法具有特异性强、灵敏度高,快速准确的优点.本实验运用了多重荧光PCR的技术,建立了检测牛羊肉类中掺杂水貂(Mustela lutreola)、猪(Sus scrofa)、鼠(Mus musculus)3种动物源性成分的检测方法.在3种动物源性的线粒体16S rDNA的保守区设计了一对通用引物,在可变区设计了水貂、猪、鼠3种物种特异性的分子信标探针,分别进行了探针的特异性验证、实验体系的灵敏度验证和样品的检出限实验.特异性验证中,3种探针均可有效排除其他物种DNA的干扰,特异扩增;灵敏度验证实验中,设置了7个DNA浓度稀释梯度,每个梯度6个重复,确定了该体系的灵敏度为0.01 ng/μL;样品检出限实验中,设置了3种掺杂方式,每种方式7个不同的掺杂质量比,每个质量比4个平行样,确定了本实验的样品检测灵敏度可达到1％(质量比).本研究结果显示,本方法能特异、准确、灵敏地鉴别出牛羊肉中水貂、猪和鼠的掺杂成分,为多物种的源性鉴别提供了科学依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡悦	山东省农业科学院生物技术研究中心	2	9	2.0	2.0
2	刘艳艳	山东省农业科学院生物技术研究中心	5	18	3.0	4.0
3	任金瑞	山东省农业科学院生物技术研究中心	2	3	1.0	1.0
4	陈蕾	山东省农业科学院畜牧兽医研究所	1	3	1.0	1.0
5	范阳阳	山东省农业科学院生物技术研究中心	3	12	3.0	3.0
6	张全芳	山东省农业科学院生物技术研究中心	6	15	3.0	3.0
7	陈雪燕	山东省农业科学院生物技术研究中心	2	3	1.0	1.0