大鼠肝细胞与胰岛内皮细胞融合细胞系的建立及鉴定

• 作者: 吕武 孙宁 张佳林 张城硕 李峰 李晓航 焦奥 石悦
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 电融合 肝细胞 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 294-298
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.2
• 字数: 3499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12007/j.issn.0258-4646.2018.04.002

摘要

目的 通过电融合法构建由肝细胞系及原代内皮细胞融合而成的杂交细胞.方法 利用EMS诱变构建BRL-3A HGPRT-缺陷型细胞;利用胆总管灌注法及胰酶消化法获得胰岛内皮细胞;利用CRY-3B细胞电融合仪及HAT筛选策略获得融合细胞;利用流式细胞仪对融合细胞的体积、细胞内颗粒密度及DNA含量进行检测;通过实时PCR及Western blotting检测融合细胞特异性基因的表达情况.结果 成功构建了一株由大鼠肝细胞系BRL-3A与原代大鼠胰岛内皮细胞融合而成的四倍体BRL-ies细胞.这株细胞既具有内皮细胞表型,表达CD31,又具有肝细胞特性,表达较高水平的谷氨酰胺合成酶.结论 肝细胞系BRL-3A可与原代内皮细胞融合形成较稳定的四倍体细胞,同时两者特征表型得以保留.