黄热病毒NS1蛋白的制备及免疫原性鉴定

• 作者: 任瑞文 余楠 刘乐斌 刘朵朵 张培 李春缘 陈月 陈荣华
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 黄热病毒 非结构蛋白1 免疫原性
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 424-428,433
• 页数: 6页
• 分类号: R373
• 字数: 4609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.073

摘要

目的 原核系统克隆表达黄热病毒(yellow fever virus,YFV)非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1),鉴定其免疫原性.方法 以YFV-17D疫苗株为模板,常规分子生物学方法构建pQE30-YFV NS1表达载体,原核表达纯化YFVNS1重组蛋白;免疫印记、免疫荧光和酶联免疫吸附实验验证其免疫原性.结果 成功构建重组质粒pQE30-YFV NS1,制备纯化可溶性YFV NS1蛋白;该重组YFV NS1蛋白与登革病毒、黄热病毒、乙脑病毒、西尼罗河病毒免疫小鼠腹水及寨卡病毒NS1、YFV NS1蛋白免疫小鼠血清均发生反应,重组YFV NS1蛋白免疫小鼠血清与YFV感染细胞超声上清也发生反应.结论 获得高纯度YFV NS1重组蛋白,且具有较好的免疫原性,含天然NS1蛋白表位,为基于NS1黄热病毒早期抗原诊断方法和蛋白功能研究奠定基础.