牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 何琪富 周军 岳华 张斌 李然 汤承 郭紫晶
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛冠状病毒 RT-PCR方法 牦牛 腹泻 呼吸道疾病综合征
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2292-2298
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.10.026

摘要

本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测.选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测.结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示;125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为71.20％,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45％.此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原.