人诱骗受体3酶联免疫定量检测方法的建立

• 作者: 伍兵 吴尚毅 吴海平 张亨山 张美 张震寰 张鲁榕 林建华 汪宽福 王锃 陈纬 陈锦容 陈龙
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人诱骗受体3 酶联免疫吸附试验 血浆 正常值
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R446.6
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2018.01.02

摘要

目的 建立检测人诱骗受体3(DcR3)含量的ELISA方法.方法 建立固相双抗体夹心法定量检测DcR3:用抗DcR3抗体包被ELISA板,捕捉样本中DcR3,再加入生物素标记的抗DcR3抗体及亲合素标记的辣根过氧化物酶,形成含酶的固相复合物,最后以底物显色,以同板上的标准曲线定量.对所建立的方法进行灵敏度、特异性、精密度、回收率、线性范围及血浆DcR3参考范围的评估.结果 所建立方法分析灵敏度为0.051 ng/mL,重复性和期间精密度分别小于10％和15％,平均回收率为90.50％.在包被抗体中加入2倍量抗TNF-α、在检测抗体中加入10倍量生物素标记的抗LIGHT、抗FAS或抗TNF-α或在DcR3标准品中加入10倍量的LIGHT纯蛋白,均不影响标准曲线的状态.检测方法的线性范围为0.25～16 ng/mL(r≥0.98).128例正常成人血浆DcR3的均值为(0.21±0.05) ng/mL,95％可信限参考值范围为0.14～ 0.28 ng/mL,无年龄及性别差异.结论 所建立的ELISA检测方法具有特异性高、灵敏度、精密度及线性好、可测范围大等特点,可用于检测人血DcR3含量.