连续流PCR芯片DNA扩增技术的研究

• 作者: 山口佳则 庄松林 张大伟 李振庆 程抒一 陶春先
• 来源期刊: 分析试验室
• 学科: 化学
• 关键词: 微流控芯片 聚合酶链式反应 毛细管电泳
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告与研究简报
• 页码范围: 1416-1420
• 页数: 5页
• 分类号: TS83|O657.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2018.0270

摘要

提出了一种基于二温区的连续流PCR微流控芯片,并通过有限元方法分析了其内部流速场与温度场分布,数值分析结果显示:(1)芯片中液体流速高于5.128 mm/s时,液体在微通道中心流速与靠近内壁的流速差异较大,不利于PCR反应;(2)当CF-PCR微流控芯片两侧施加96℃和65℃高温时,液态水可以在0.1mm内迅速实现变温,且中间未施温部分保持在73℃,为DNA实现PCR提供了变性、退火与延伸所需温度.实验结果表明,压力法进样可使流速误差稳定在3％以内,采用铝块对PCR芯片加热可使温度误差控制在0.3％.最后在CF-PCR芯片内对牙龈卟啉单胞菌实施了PCR,并用毛细管电泳检测了其PCR产物,数据显示在芯片内4'51"可以成功实现PCR.本方法对快速PCR仪器的开发具有重要的应用价值.