人骨形成因子7基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

• 作者: 屈彦纯 朱小泉 杨泽 杨阔 王嘉南 王爱香 郭嘉宁
• 来源期刊: 中国老年保健医学
• 关键词: 慢病毒 BMP7 骨髓间充质干细胞 糖尿病肾病
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 字数: 3427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2671.2018.04.008

摘要

BMP7是骨形成因子家族的一个成员,它不仅是一个重要的成骨生长因子,而且在糖尿病肾脏损伤保护和逆转中扮演重要的角色.干细胞治疗已经逐渐发展为糖尿病肾病治疗的一种有效手段,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是BMP7的体内天然分泌细胞.本研究旨在通过构建BMP7重组慢病毒表达载体,感染MSCs,并进行鉴定,从而建立BMP7高表达的MSCs细胞系.首先通过PCR法扩增BMP7基因的蛋白编码序列,并克隆入pCDH-BMP7慢病毒载体,其后与包装质粒共转染293T细胞包装病毒,将慢病毒感染小鼠MSCs,荧光显微镜下鉴定感染率.最后,采用定量PCR和Western blot检测BMP7的表达.测序结果表明pCDH-BMP7慢病毒载体构建成功,包装病毒产生的病毒液滴度为5×108 TU/ml,慢病毒感染小鼠MSCs的转染率高于75％,定量PCR和Western blot结果均显示BMP7表达比对照组显著升高.结果表明BMP7重组慢病毒载体构建成功,包装得到高浓度滴度病毒液,感染小鼠MSCs能稳定过表达BMP7蛋白,为进一步探索高表达BMP7的MSCs治疗糖尿病肾脏损伤的研究提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨阔	天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所	21	61	4.0	7.0
2	王爱香	天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所	28	159	8.0	11.0
3	屈彦纯	天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所	2	1	1.0	1.0
4	郭嘉宁	天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所	2	1	1.0	1.0
5	朱小泉		2	6	1.0	2.0
6	王嘉南	天津医科大学第二医院天津市泌尿外科研究所	2	1	1.0	1.0