二氢生物喋呤还原酶减轻脂肪酸诱导的细胞凋亡的机制研究

• 作者: 冯茹 古艳婷 孙斯凡
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 二氢生物喋呤还原酶 HEK293T细胞 凋亡 Beclin 1 活性氧簇
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 181-184
• 页数: 4页
• 分类号: R587.24
• 字数: 2115字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.02.004

摘要

目的 探讨二氢生物喋呤还原酶(QDPR)高表达对脂肪酸(PA)诱导的细胞凋亡的作用.方法 HEK293T细胞转染实验分为A、B、C 3组,A组为空载体转染组,B组为经过PA刺激的空载体转染组,C组为经过PA刺激的QDPR重组质粒转染组.首先将空载体及构建的QDPR重组质粒分别转染至HEK293T细胞,培养24 h后采用0. 5 mmol/L PA刺激上述细胞,将没有经过PA刺激的空载体组细胞、PA刺激的空载体组细胞和PA刺激QDPR重组质粒组细胞三组细胞继续培养24 h后收集细胞.采用四氢生物喋呤(BH4)和活性氧簇(ROS)检测试剂盒检测3组BH4和ROS的生成量;采用Western blot法检测3组凋亡相关蛋白Beclin 1 、Caspase 3和Beclin 2的表达.结果 ①转染细胞后,QD-PR融合蛋白成功表达;②与A组相比,B组的BH4生成量差异无统计学意义;与B组相比,C组BH4生成量明显增多(P<0.05);③与A组相比,B组的ROS生成量明显增加(P<0.05);与B组相比,C组ROS生成量明显下降(P<0. 05);④Western blot结果显示:与A组相比,B组经过PA刺激后细胞中Beclin 1和Caspase 3表达水平显著上调(P< 0.05),Beclin 2表达水平下降(P<0. 05);QDPR过表达后C组Beclin 1和Caspase 3表达水平显著下调(P<0. 05) , Beclin 2表达水平升高(P<0.05).结论 QDPR高表达后,可以刺激BH4的生成,同时能降低PA诱导的ROS的生成量,还可以降低细胞凋亡相关蛋白Beclin 1和Caspase 3的表达,增强抗凋亡蛋白Beclin 2的表达,提示其可能通过调节 BH4和ROS含量影响细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	古艳婷	航空总医院药剂科	14	33	3.0	5.0
2	冯茹	航空总医院药剂科	6	17	3.0	4.0
3	孙斯凡	航空总医院药剂科	1	0	0.0	0.0