二氢生物喋呤还原酶参与调控HEK293T细胞自噬作用的初步研究

• 作者: 古艳婷 孙斯凡 张浩军 朱斌 李平 董晞 费敏 赵婷婷 韩文兵
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 二氢生物喋呤还原酶 自噬 糖尿病肾病 LC3 Beclin1
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R332
• 字数: 3323字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2012.011.001

摘要

目的 探讨二氢生物喋呤还原酶(dihydropteridine reductase,QDPR)对HEK293T细胞自噬作用的影响.方法 构建野生型QDPR和突变型QDPR重组质粒分别转染HEK293T细胞,并设空载体对照组.采用RT-PCR及Western blot方法检测空载体组,野生型QDPR组和突变型QDPR组自噬相关蛋白LC3和Beclin 1的表达量变化.结果 1)测序结果证实PCR扩增得到编码正常QDPR的cDNA序列正确以及突变的cDNA也在正确的位置突变;2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,野生型QDPR和突变型QDPR融合蛋白成功表达;3)RT-PCR 结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3基因水平明显上调(P<0.05),突变型QDPR组LC3基因水平与对照组相比无统计学差异;与对照组相比,野生型和突变型组Beclin1基因水平无统计学差异;4)Western blot结果显示,与对照组相比,野生型QDPR组LC3-II和Beclin1的蛋白表达量明显上调(P<0.05),但LC3-I的蛋白表达量无统计学差异,突变型QDPR组与对照组相比LC3-I,II和Beclin1的蛋白表达量均没有统计学差异(P>0.05).结论 二氢生物喋呤还原酶能增强HEK293T细胞自噬相关基因LC3和Beclin 1的表达,提示其可能具有激活自噬作用的功能;二氢生物喋呤还原酶93位氨基酸的突变影响了其对细胞自噬作用的调控,降低了自噬标志分子LC3-I和Beclin1的基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李平		3	9	2.0	3.0
2	孙斯凡		2	7	1.0	2.0
3	古艳婷		1	6	1.0	1.0
7	赵婷婷		1	6	1.0	1.0
8	张浩军		1	6	1.0	1.0
9	朱斌		7	46	4.0	6.0
10	韩文兵		1	6	1.0	1.0
11	董晞		1	6	1.0	1.0
12	费敏		1	6	1.0	1.0