miR-103a-3p通过调控FEZF1/CDC25A途径影响肝癌细胞的增殖和凋亡

• 作者: 李晓冬 杨志 杨雨澎
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 关键词: 肝癌细胞 miR-103a-3p 锌指蛋白 细胞分裂周期25A蛋白 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1158-1163
• 页数: 6页
• 字数: 4807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4695.2018.11.011

摘要

目的 探究miR-103a-3p在肝癌细胞的表达及其与锌指蛋白1(FEZF1)/细胞分裂周期25A蛋白(CDC25A)途径的关系.方法 体外培养人肝癌HepG2、BEL-7402细胞,将转染试剂、miR-103a-3p阴性对照质粒、miR-103a-3p mimis质粒分别转染细胞,命名为空白对照组、miR-103a-3p阴性转染组、miR-103a-3p过表达组.实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-103a-3p mRNMA表达;MTT法检测细胞增殖情况;平板细胞克隆形成试验检测菌落形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡以及周期分布情况;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞中FEZF1、CDC25A蛋白表达情况;荧光素酶活性检测miR-103a-3p与FEZF1靶向调控关系.结果 在HepG2细胞、BEL-7402细胞中,与空白对照组、阴性转染组相比,miR-103a-3p过表达组miR-103a-3p mRNA表达显著升高(P<0.05).随着细胞培养时间延长,miR-103a-3p过表达组细胞抑制率逐渐升高,在同一时间点,与空白对照组、阴性转染组相比,miR-103a-3p过表达组细胞抑制率均升高(P<0.05).与空白对照组、阴性转染组相比,细胞菌落数量显著降低,细胞凋亡率显著升高,G0/G1期DNA含量升高,S期细胞DNA含量下降,FEZF1、CDC25A蛋白表达均降低(P<0.05).荧光素酶活性测定显示,在3'UTR-Wt的细胞中,与阴性转染组相比,miR-103a-3p过表达组荧光素酶活性显著降低(P<0.05);而3'UTR-Mut的细胞中,阴性转染组与miR-103a-3p过表达组荧光素酶活性无显著差异(P>0.05).结论 miR-103a-3p过表达后能够抑制肝癌细胞的增殖,引起细胞周期G0/G1期阻滞,促进其凋亡,其机制可能与靶向调控FEZF1/CDC25A表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓冬	哈尔滨医科大学附属第四医院普外科	47	196	8.0	11.0
2	杨雨澎	哈尔滨医科大学附属第四医院普外科	4	2	1.0	1.0
3	杨志	哈尔滨医科大学附属第四医院普外科	1	1	1.0	1.0