引起奶牛隐性乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的多重PCR检测

• 作者: 赵云焕 邓凯伟 马德青
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（下半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 奶牛隐性乳房炎 多重PCR 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 沙雷氏菌
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 90-92
• 页数: 3页
• 分类号: S858.23|S857.2+6
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.05.0216

摘要

为了能同时检测奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌三种病原菌,试验设计了3对不同的特异性引物,在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌单重PCR的基础上进行多重PCR扩增.结果 表明:扩增体系(50 μL)为DNA Polymerase 1μL,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌上、下游引物各1 μL,混匀后取混合物5μL,2×Multiplex Buffer 25 μL,DNA模板各2μL,ddH2O13μL.扩增程序为95℃5 min;95℃30 s,60 C 90 s,72℃1 min,35个循环;72℃10 min.设计的多重PCR方法可同时扩增出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的目的基因片段.说明用设计的3对特异性引物进行的多重PCR扩增特异性强,可用于临床.