gfp融合的甲基对硫磷水解酶基因mph在E. coli中的表达

• 作者: 严红 程杨 马立新 黄灿
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 甲基对硫磷水解酶 GFP mph-r基因 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生物催化与转化研究专栏
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 2382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2019.01.005

摘要

依照大肠杆菌密码子的偏爱性将来源于Pseudomonas sp. M6的有机磷水解酶基因mph设计合成了新的有机磷水解酶基因,然后将其与GFP融合进行表达,构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌.设计优化后所合成的mph-r基因全长927 bp,然后将基因克隆到p ET23a-gfp大肠杆菌表达型质粒上,成功构建了重组表达质粒p ET23a-gfpmph-r,转化大肠杆菌感受态Rosetta blue.经过诱导剂IPTG的低温诱导24 h后,收集细胞,通过SDS-PAGE和Western Blot检测融合蛋白的表达.实验结果显示,融合蛋白的表达量大大提高,且通过酶活分析测定,全细胞酶活达到了11.2 U/m L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马立新	湖北大学生命科学学院	77	616	14.0	21.0
2	黄灿	湖北大学生命科学学院	3	1	1.0	1.0
3	程杨	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	严红	湖北大学生命科学学院	5	54	3.0	5.0