CRY1在雄性牦牛生殖轴中的表达与分布

• 作者: 吕琛 张全伟 张勇 王媛媛 王琪 赵兴绪 赵彩英 陈健楠 马友记
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 隐花色素1基因(CRY1) 生殖轴 基因克隆 表达分布
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 专题:高原特色动物生理生化研究
• 页码范围: 1869-1877
• 页数: 9页
• 分类号: S824
• 字数: 6648字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.10.017

摘要

隐花色素1 (cryptochrome 1,CRY1)基因是哺乳动物生物钟基因之一,其表达蛋白既是光受体又是生物钟的组成部分,经体液和神经途径送达效应器,调节生理、生化和节律行为.本研究采集牦牛(Bos grunniens)的下丘脑、垂体、松果体及睾丸组织,通过反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术对CRY1编码区序列进行克隆和序列分析,通过荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色技术分析CRY1在成年雄性牦牛生殖轴系及不同年龄段(30日龄,2,4和6岁龄)雄性牦牛睾丸中的表达规律.结果 显示,CRY1基因CDS全长为1 712bp,ORF为1 257 bp (GenBank No.MN460656),共编码418个氨基酸残基,无跨膜结构区,编码的蛋白属可溶性蛋白;组织表达与分布结果发现,CRY1 mRNA和蛋白在雄性牦牛下丘脑、垂体、睾丸及松果体组织中均有表达,在松果体组织中的表达水平极显著高于其他组织(P＜0.01);免疫组织化学染色结果显示,在下丘脑室旁核细胞、垂体细胞、睾丸各级生精细胞、松果体细胞和神经胶质细胞上均有阳性表达;不同年龄段睾丸组织中表达结果发现,CRY1 mRNA和蛋白在30日龄睾丸中的表达量最低,随着年龄的增长,表达量逐渐增高.研究结果表明,CRY1在动物进化中比较保守,在雄性牦牛性腺轴和不同年龄牦牛睾丸中均有表达,推测其可能在牦牛生殖过程中起着重要作用.上述结果为牦牛生物节律基因CRY1的生物学功能及其在牦牛生殖生理调控的相关研究提供依据.