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摘要:
目的 分析长爪沙鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (Cystatin C,CST3) cDNA序列同源性,并建立CST3蛋白原核表达体系,为长爪沙鼠CST3抗体制备和后续基因功能研究奠定基础.方法 对长爪沙鼠Cst3 cDNA序列进行克隆、同源性分析及密码子优化;将优化后序列酶切连接到pET28a载体,完成重组CST3蛋白表达载体构建;将该载体转化到感受态细胞中,通过异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导实现CST3蛋白的原核表达,并用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)验证.结果 长爪沙鼠Cst3基因与人和小鼠Cst3基因的序列同源性较低.密码子优化后的长爪沙鼠Cst3表达序列插入到pET28a质粒中,获得了CST3蛋白表达载体.经1 mmol/L IPTG 37℃诱导12h,可获得大量CST3蛋白.结论 成功地构建了长爪沙鼠CST3蛋白的体外表达体系.
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文献信息
篇名 长爪沙鼠CST3序列同源性分析及蛋白体外表达
来源期刊 实验动物科学 学科 生物学
关键词 长爪沙鼠 CST3 原核表达
年,卷(期) 2019,(2) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 1-8
页数 8页 分类号 Q789
字数 4502字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1006-6179.2019.02.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘欣 首都医科大学基础医学院 93 538 12.0 18.0
2 杜小燕 首都医科大学基础医学院 55 242 10.0 12.0
3 路静 首都医科大学基础医学院 18 92 6.0 9.0
4 陈振文 首都医科大学基础医学院 78 366 11.0 15.0
5 李长龙 首都医科大学基础医学院 19 30 3.0 4.0
6 王妍 首都医科大学基础医学院 8 19 2.0 4.0
7 郭萌 首都医科大学基础医学院 14 57 5.0 7.0
8 吕建祎 首都医科大学基础医学院 5 2 1.0 1.0
9 霍学云 首都医科大学基础医学院 9 20 3.0 4.0
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研究主题发展历程
节点文献
长爪沙鼠
CST3
原核表达
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
实验动物科学
双月刊
1006-6179
11-5508/N
16开
北京朝阳区北苑路28号院1号楼9层
18-131
1984
chi
出版文献量(篇)
2240
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5
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11769
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