绵羊痘病毒和山羊痘病毒实时荧光重组酶聚合酶检测方法的建立

• 作者: 刘生峰 史梅梅 吴蕊 周庆 唐昌杰 张欢 李应国 李贤良 杨俊 王国民 王昱 聂福平 陈冉越
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊痘病毒 山羊痘病毒 重组酶聚合酶扩增
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 544-550
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0066

摘要

为建立一种快速、敏感鉴别诊断绵羊痘病毒(SPPV)和山羊痘病毒(GTPV)的方法,本研究根据SPPV和GTPV基因组保守区,分别设计特异性引物和探针,建立了SPPV和GTPV实时荧光RPA (real-time fluorescent recombinase polymerase amplification)检测方法.结果显示,该方法仅对SPPV和GTPV的靶基因扩增呈阳性,而对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、传染性脓疱病毒(ORFV)、蓝舌病病毒(BTV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、水疱性口炎病毒(VSV)、A型口蹄疫病毒(FMDV type A)、O型口蹄疫病毒(FMDV type O)、亚洲1型口蹄疫病毒(FMDV Asia 1)等相关病毒检测结果均为阴性,特异性良好;对SPPV和GTPV检测的灵敏度分别为4.72×102 copies/μL和4.35×102 copies/μL;利用该方法对临床样品进行检测,与OIE推荐的普通PCR检测结果符合率为100％.结果表明,建立的SPPV和GTPV实时荧光RPA方法灵敏、快速、特异性强,为SPPV和GTPV感染的早期诊断提供了技术支持,适用于SPPV和GTPV的检疫、疫情监测及流行病学调查,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义.