IL-1β参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡的研究

• 作者: 吴晓玲 曾瑾 蔡卫卫 邓光存 马臣杰
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-1β RAW264.7细胞 BCG 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 386-393
• 页数: 8页
• 分类号: R378.911
• 语种: 中文
• DOI: 10.13350/j.cjpb.190403

摘要

目的 白细胞介素-1β Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌.IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程.本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(BacillusCalmette-Guerin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡作用及其机制. 方法 设计并合成IL 1β的小干扰RNA(si-IL-1β),转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后并用BCG感染,采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中IL-1β的分泌水平,DCF法检测细胞内ROS水平,AnnexinV-FITC/碘化丙啶(propidine iodide,PI)双荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡相关因子Caspase3、Bad、Bax以及Mcl-1蛋白及其基因(mRNA)的表达. 结果 BCG感染巨噬细胞24 h后,IL-1β表达水平极显著上调,并且呈时间梯度依赖性(P＜0.01);同时,与对照相比,BCG感染后巨噬细胞存活率下降,约为33％,而凋亡率显著上调到58.56％ (P＜0.01),并且凋亡关键调控因子Caspase3、Bad、Bax的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P＜0.01),而抑凋亡蛋白Mcl-1的表达水平显著下调(P＜0.01),细胞内ROS富集(P＜0.05),而si-IL-1β处理可显著逆转由BCG诱发的细胞凋亡、ROS含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等. 结论 BCG可诱导细胞内IL-1β的表达;IL-1β通过上调促凋亡蛋白Bad、Bax表达,下调抑凋亡蛋白Mcl 1表达,上调细胞内ROS的表达并参与调控BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡.这为阐明IL-1β在BCG诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾瑾		35	165	8.0	11.0
2	邓光存		37	252	9.0	14.0
3	吴晓玲		40	483	13.0	20.0
4	马臣杰		7	10	2.0	3.0
5	蔡卫卫		1	0	0.0	0.0