肉葡萄球菌电转化条件的优化

• 作者: 唐巧巧 张健 张变强 朱燕 柯灵超 王德培 高强
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肉葡萄球菌 电转化 转化效率
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 食品与生物技术
• 页码范围: 8-14
• 页数: 7页
• 分类号: Q93
• 字数: 6241字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20170319

摘要

肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作为革兰氏阳性菌,遗传转化难度大是限制其遗传操作的主要因素之一.通过优化菌体生长状态、电击缓冲液、复苏培养基组分等条件,分析了各因素对S.carnosus TM300电转化效率的影响.研究表明:S.carnosus TM300在B2生长培养基中生长到A578=0.6时收集菌体,使用GS电击缓冲液洗涤菌体制备感受态细胞,在电压2450 V、间距2 mm电转杯条件下进行电转化,电击后立即加入LBM复苏培养基,37℃、180 r/min摇床复苏培养4 h,可以获得的最佳电转化效率为5.95×103μg-1.