三种大肠杆菌表达的口蹄疫病毒A型多表位蛋白对猪的免疫原性比较

• 作者: 付元芳 刘在新 卢曾军 曹轶梅 李冬 李坤 王兴凯 王省
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 口蹄疫病毒 A型 多表位蛋白疫苗 猪
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 711-718
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20180276

摘要

[目的]研制猪口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)A型多表位蛋白疫苗,为猪FMDV A型的防控提供安全有效的疫苗.[方法]根据前期试验结果及国内外FMDV A型流行病学信息,设计并合成了3种多表位免疫原基因A10、IA10和FA10.在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化复性后,制苗免疫猪.分别于免疫前和免疫后14和28 d采血分离血清,用液相阻断ELISA (LPB-ELISA)方法检测血清IgG抗体滴度.免疫28 d后用FMDV强毒攻毒,以评估免疫保护效果.[结果]SDS-PAGE和Western blotting结果证实A10、IA10和FA10三种蛋白均获得表达,分子量分别为35、57和64 kDa,与预测蛋白大小一致,且能被FMDV感染阳性血清所识别.LPB-ELISA结果表明,A10+201免疫组IgG滴度低于灭活疫苗组,但高于其他免疫组.攻毒后A10+201免疫组和灭活疫苗免疫组全部猪(5/5)获得保护,IA10+201和FA10+201免疫组80％ (4/5)猪保护,A10和FA10免疫组只有20％ (1/5)猪保护,而PBS+201组所有猪均未保护.[结论]A10+201免疫保护效果较好,可作为候选疫苗进行进一步评价.