检测猪鼻支原体抗原的ELISA方法的建立及其应用

• 作者: 冯力 刘丹 刘长明 危艳武 吴洪丽 夏德利 朱红振 边海桥 黄立平
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪鼻支原体 单克隆抗体 抗原检测 ELISA
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 828-833
• 页数: 6页
• 分类号: S852.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0121

摘要

为了建立检测猪鼻支原体(Mhr)抗原的ELISA方法,本研究采用杂交瘤技术制备了抗Mhr菌体的特异性单克隆抗体(MAb),经亲和层析纯化后标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了一种能够检测Mhr抗原的ELISA方法.ELISA反应条件优化结果为:HRP标记的MAb最适稀释度为1∶1 000,该方法的批内和批间变异系数均小于6％,经超声波处理Mhr抗原效果更佳,最低抗原检出量为25 ng.用该方法对已知猪肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)抗原检测无交叉反应.本研究建立的检测Mhr抗原的ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为Mhr体外培养物抗原定量检测提供可靠的技术手段.