摘要:
利用DNA条形码技术通过psbA-trnH, mat K, trn L序列分析, 建立一种快速鉴定野菊和药用菊的方法.提取21份样品的基因组DNA, 对psbA-trnH, mat K, trn L片段进行PCR扩增, 双向测序, 获得其psbA-trnH, mat K, trn L序列信息;运用MEGA 7. 0对所有样品的psbA-trnH, mat K, trn L序列共63条进行比对、计算种内种间遗传距离, 分析psbA-trnH+mat K+trn L组合序列SNPs分布, 构建Neighbor-Joining (NJ) 系统进化树.结果显示, 野菊, 野菊 (菊花脑) 和药用菊的种内种间遗传距离重合; psbA-trnH+mat K+trn L组合序列的SNPs分析显示其组合序列共有19个核苷酸多态性位点 (SNPs) , 野菊较野菊 (菊花脑) 、药用菊呈现更为明显的序列多态性, psbA-trnH序列表现出较为明显的长度变异; NJ树显示药用菊与野菊、野菊 (菊花脑) 区别开来, 其中编号为C2~C5的药用菊单独聚为一亚支, 置信度为62%, 编号为Z9, Z10的野菊均采自甘肃省, 单独聚为一支, 置信度为77%;同时也发现来自西北地域的野菊样品, 其psbA-trnH和trn L序列信息变化与地域和环境之间有明显的相关, 野菊与野菊 (菊花脑) 具有明显的分化, 同时还是药用菊的进化来源.因此, 将psbA-trnH+mat K+trn L组合序列作为DNA条形码能准确、快速的鉴别野菊和药用菊, 为其种质资源鉴定及物种鉴别提供了重要依据.