PUMA-BH3结构域肽的改造、表达及抗肿瘤活性

• 作者: 刘兴汉 刘岩 刘远莉 张宇雯 李冀宏 董兴丽
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BH3结构域 基因改造 重组表达 抗肿瘤活性
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 203-209
• 页数: 7页
• 分类号: R34|Q789
• 字数: 5393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2019.03.000

摘要

目的 改造、表达人PUMA-BH3结构域基因,并检测其抗肿瘤活性.方法 改造PUMA BH3结构域两端的氨基酸序列(A134G、G138A、Q151M),并在C端加上5个连续的精氨酸,人工合成相应的核苷酸序列,连接到质粒pTWIN1中,再转化至大肠埃希菌BL21 (DE3)中表达,经几丁质亲和层析树脂一步纯化获得M28肽.分别用MTT比色法测定细胞增殖的抑制,AO/EB荧光染色法检测细胞凋亡,JC-1染色流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化.结果 M28肽对人SGC-7901胃腺癌细胞的增殖具有明显的抑制作用,且存在量效关系,活性强于PUMA-BH3肽.作用24h后,观察到细胞凋亡现象,M28肽处理组凋亡细胞数量较PUMA-BH3肽组明显增加,细胞凋亡率大于50％;弱荧光细胞比例增加到90％以上,提示SGC-7901细胞线粒体内膜功能受损.结论 M28肽具有更强抗肿瘤活性,且生产工艺简单,在肿瘤治疗上有潜在的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘兴汉	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	35	105	6.0	8.0
2	刘岩	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	56	284	9.0	14.0
3	李冀宏	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	7	31	3.0	5.0
4	张宇雯	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	4	19	3.0	4.0
5	刘远莉	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	10	20	3.0	3.0
6	董兴丽	哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	2	0	0.0	0.0