斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析

• 作者: 李升云 胡波 董双林 韩琪
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斜纹夜蛾 气味结合蛋白 双荧光素酶报告基因检测 启动子 增强子 沉默子
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 植物科学
• 页码范围: 1059-1066
• 页数: 8页
• 分类号: S436.3
• 字数: 6382字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201904004

摘要

[目的]本文旨在鉴定重要农业害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)气味结合蛋白基因GOBP2的顺式作用元件,为揭示GOBP2的转录调控机制和开发基于嗅觉干扰的害虫防治技术奠定基础.[方法]利用5′RACE技术克隆GOBP2的5′UTR,确定转录起始位点;利用染色体步移技术(chromosome walking)克隆GOBP2的5′侧翼区,并利用在线网站预测转录因子结合位点;利用PCR克隆GOBP2的5′侧翼区逐步缺失片段,并构建到pGL3-Basic载体上;将各重组载体分别转染Sf9细胞,48 h后收获细胞并利用双荧光素酶报告系统检测转录活性.[结果]获得斜纹夜蛾GOBP2长23 bp的5′UTR,由此确定GOBP2的转录起始位点.通过染色体步移获得斜纹夜蛾GOBP2的5′端调控区2025 bp的序列,发现启动子的典型TATA框;针对-1000 bp序列的转录活性分析表明,最强转录活性区域位于-243～-207 bp,具有1个增强子;此外,在-971～-891 bp及-890～-811 bp各有1个增强子,在-244～-315 bp存在1个沉默子.[结论]获得斜纹夜蛾GOBP2的转录起始位点及顺式作用元件,为进一步研究GOBP2的转录调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董双林	南京农业大学植物保护学院	33	526	14.0	22.0
2	胡波	南京农业大学植物保护学院	3	1	1.0	1.0
3	韩琪	南京农业大学植物保护学院	2	0	0.0	0.0
4	李升云	南京农业大学植物保护学院	1	0	0.0	0.0