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摘要:
[目的]本文旨在鉴定重要农业害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)气味结合蛋白基因GOBP2的顺式作用元件,为揭示GOBP2的转录调控机制和开发基于嗅觉干扰的害虫防治技术奠定基础.[方法]利用5′RACE技术克隆GOBP2的5′UTR,确定转录起始位点;利用染色体步移技术(chromosome walking)克隆GOBP2的5′侧翼区,并利用在线网站预测转录因子结合位点;利用PCR克隆GOBP2的5′侧翼区逐步缺失片段,并构建到pGL3-Basic载体上;将各重组载体分别转染Sf9细胞,48 h后收获细胞并利用双荧光素酶报告系统检测转录活性.[结果]获得斜纹夜蛾GOBP2长23 bp的5′UTR,由此确定GOBP2的转录起始位点.通过染色体步移获得斜纹夜蛾GOBP2的5′端调控区2025 bp的序列,发现启动子的典型TATA框;针对-1000 bp序列的转录活性分析表明,最强转录活性区域位于-243~-207 bp,具有1个增强子;此外,在-971~-891 bp及-890~-811 bp各有1个增强子,在-244~-315 bp存在1个沉默子.[结论]获得斜纹夜蛾GOBP2的转录起始位点及顺式作用元件,为进一步研究GOBP2的转录调控机制奠定了基础.
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文献信息
篇名 斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析
来源期刊 南京农业大学学报 学科 农学
关键词 斜纹夜蛾 气味结合蛋白 双荧光素酶报告基因检测 启动子 增强子 沉默子
年,卷(期) 2019,(6) 所属期刊栏目 植物科学
研究方向 页码范围 1059-1066
页数 8页 分类号 S436.3
字数 6382字 语种 中文
DOI 10.7685/jnau.201904004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 董双林 南京农业大学植物保护学院 33 526 14.0 22.0
2 胡波 南京农业大学植物保护学院 3 1 1.0 1.0
3 韩琪 南京农业大学植物保护学院 2 0 0.0 0.0
4 李升云 南京农业大学植物保护学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
斜纹夜蛾
气味结合蛋白
双荧光素酶报告基因检测
启动子
增强子
沉默子
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
南京农业大学学报
双月刊
1000-2030
32-1148/S
大16开
南京市卫岗1号
28-53
1956
chi
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