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斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析
斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析
作者:
李升云
胡波
董双林
韩琪
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
斜纹夜蛾
气味结合蛋白
双荧光素酶报告基因检测
启动子
增强子
沉默子
摘要:
[目的]本文旨在鉴定重要农业害虫斜纹夜蛾(Spodoptera litura)气味结合蛋白基因GOBP2的顺式作用元件,为揭示GOBP2的转录调控机制和开发基于嗅觉干扰的害虫防治技术奠定基础.[方法]利用5′RACE技术克隆GOBP2的5′UTR,确定转录起始位点;利用染色体步移技术(chromosome walking)克隆GOBP2的5′侧翼区,并利用在线网站预测转录因子结合位点;利用PCR克隆GOBP2的5′侧翼区逐步缺失片段,并构建到pGL3-Basic载体上;将各重组载体分别转染Sf9细胞,48 h后收获细胞并利用双荧光素酶报告系统检测转录活性.[结果]获得斜纹夜蛾GOBP2长23 bp的5′UTR,由此确定GOBP2的转录起始位点.通过染色体步移获得斜纹夜蛾GOBP2的5′端调控区2025 bp的序列,发现启动子的典型TATA框;针对-1000 bp序列的转录活性分析表明,最强转录活性区域位于-243~-207 bp,具有1个增强子;此外,在-971~-891 bp及-890~-811 bp各有1个增强子,在-244~-315 bp存在1个沉默子.[结论]获得斜纹夜蛾GOBP2的转录起始位点及顺式作用元件,为进一步研究GOBP2的转录调控机制奠定了基础.
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文献信息
篇名
斜纹夜蛾气味结合蛋白基因GOBP2转录调控区的克隆及活性分析
来源期刊
南京农业大学学报
学科
农学
关键词
斜纹夜蛾
气味结合蛋白
双荧光素酶报告基因检测
启动子
增强子
沉默子
年,卷(期)
2019,(6)
所属期刊栏目
植物科学
研究方向
页码范围
1059-1066
页数
8页
分类号
S436.3
字数
6382字
语种
中文
DOI
10.7685/jnau.201904004
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
董双林
南京农业大学植物保护学院
33
526
14.0
22.0
2
胡波
南京农业大学植物保护学院
3
1
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韩琪
南京农业大学植物保护学院
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南京农业大学植物保护学院
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气味结合蛋白
双荧光素酶报告基因检测
启动子
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研究去脉
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南京农业大学学报
主办单位:
南京农业大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1000-2030
CN:
32-1148/S
开本:
大16开
出版地:
南京市卫岗1号
邮发代号:
28-53
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
2940
总下载数(次)
5
总被引数(次)
46407
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