中国水仙LAR基因启动子的克隆及功能初步分析

• 作者: 周平 姚红 彭嘉宇 曾黎辉 范雨昕
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中国水仙 NtLAR 启动子 表达调控机制
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1353-1360
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5582字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2019.08.1353

摘要

为了解NtLAR基因的表达调控机制,该研究以中国水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)'金盏银台'DNA为模版,采用染色体步移法克隆了NtLAR基因起始密码子ATG上游启动子片段序列,测序结果显示,该克隆片段共995 bp(GenBank登录号:M H371155).通过PlantCare数据库对获得的启动子序列顺式作用元件预测发现,NtLAR启动子序列中包含有大量顺式作用元件,如光反应元件ACE、G-box、GATA-motif、GT1-motif,激素响应元件CGTCA-motif、ABRE、TGACG-motif、TGA-element,胁迫响应元件和MYB结合位点MBS等.成功构建了植物表达载体pBI121-pNtLAR∷GUS和pGreenII 0800-pNtLAR-Luc.pBI121-pNtLAR∷GUS在烟草叶片的瞬时表达结果显示,克隆的启动子片段具有活性;pBI121-pNtLAR∷GUS在水仙不同组织器官的瞬时表达实验发现,N tL A R基因的表达具有组织特异型,其在鳞茎盘的表达量较高,在花瓣和副冠中的表达量较低;将pBI121-pNtLAR∷GUS分别和中国水仙R2R3-MYB转录因子NtMYB2、NtMYB5混合注射烟草叶片,GUS染色结果显示NtMYB2和NtMYB5并不能抑制NtLAR启动子的活性,定量PCR结果与GUS染色结果一致.采用pGreenII 0800-pNtLAR-Luc载体进行双荧光素酶实验进一步验证了GUS染色实验和定量PCR结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾黎辉	福建农林大学园艺学院	44	407	13.0	19.0
2	周平	福建农林大学园艺学院	8	3	1.0	1.0
3	姚红	福建农林大学园艺学院	4	3	1.0	1.0
4	范雨昕	福建农林大学园艺学院	2	0	0.0	0.0
5	彭嘉宇	福建农林大学园艺学院	1	0	0.0	0.0