布鲁氏菌VirB12蛋白纯化及其抗体ELISA方法的初步建立

• 作者: 冯生 刘宝山 刘梦志 叶银波 张婷婷 杨江花 沈国顺 陈泽良
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏菌 VirB12蛋白 纯化 ELISA
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 154-160
• 页数: 7页
• 分类号: S858.23
• 字数: 5264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2019.02.004

摘要

为获得高纯度布鲁氏菌VirB12蛋白,对VirB12分泌表达蛋白先后进行亲和纯化和离子交换纯化.将其作为抗原包被ELISA板,优化反应条件后初步建立了布鲁氏菌抗体的ELISA检测方法.结果表明:蛋白纯化效果良好,重组蛋白纯度可达到98％以上.在建立的ELISA中,纯化重组蛋白的最佳包被浓度为1μg?mL-1,最适封闭剂为5％脱脂奶粉,血清最佳稀释浓度为1:25,酶标二抗最佳工作浓度为1:1500.对20份阳性血清及12份阴性血清的检测结果表明,其与SUANOVIR Brucella-Ab C-ELISA试剂盒的总体符合率达到90.6％,表明本试验建立的以VirB12重组蛋白为抗原的ELISA方法可以检测布氏杆菌感染抗体,有望研制成试剂盒用于养殖场布病的检测和净化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈国顺	沈阳农业大学畜牧兽医学院	105	608	15.0	21.0
2	刘宝山	沈阳农业大学畜牧兽医学院	51	164	8.0	10.0
3	张婷婷	沈阳农业大学畜牧兽医学院	20	116	4.0	10.0
4	陈泽良	沈阳农业大学畜牧兽医学院	4	1	1.0	1.0
5	刘梦志	沈阳农业大学畜牧兽医学院	6	4	1.0	2.0
6	冯生	沈阳农业大学畜牧兽医学院	3	1	1.0	1.0
7	杨江花	沈阳农业大学畜牧兽医学院	1	1	1.0	1.0
8	叶银波	沈阳农业大学畜牧兽医学院	1	1	1.0	1.0