抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白中和活性单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘文晓 李永清 洪家兵 王萍
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1514-1519
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0195

摘要

为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD蛋白的单克隆抗体,本研究用纯化的 IBRV免疫 BALB/c小鼠,然后以纯化的昆虫细胞表达的 gD蛋白作为 ELISA包被抗原筛选杂交瘤细胞株.结果获得 3株能够稳定分泌抗 gD蛋白羊克隆抗体的杂交瘸细胞株 1B4 、3E8和 4F12. 采用夹心 ELISA鉴定单元隆抗体的 Ig亚类,结果显示,1B4 、3E8为 IgG2b ,4F12 为 IgG1.免疫印迹试验与间接免疫荧光试验表明,3株单克隆抗体均能与 IBRV发生特异性反应.微量中和试验结果显示,1B4和 3E8单克隆抗体具有中和 IBRV的活性,中和效价均为 1∶320.本研究成功制备了具备中和作用的抗牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白单克隆抗体,为建立特异性的 IBRV诊断方法及致病机理的研究提供了工具.