HIV-1 p24抗原的真核表达及其血清学诊断应用

• 作者: 宋伟 王颖 邵一鸣 郝彦玲 陈祥雨
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: HIV-1 核心抗原p24 真核表达 血清学诊断
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 591-595
• 页数: 5页
• 字数: 4106字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.08.005

摘要

目的 在真核系统中表达全长人类免疫缺陷病毒1(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)p24抗原,鉴定其抗原性,探讨其在HIV早期诊断中的价值.方法 利用PCR技术分别扩增p24基因和DRVI信号肽基因,通过融合PCR在p24基因前添加来自gp140质粒的DRVI信号肽序列,并分别将其克隆至pDRVI1.0载体,获得两种重组质粒pDRVI-p24和pDRVI-p24s.将重组质粒转染293F细胞,通过SDS-PAGE检测p24蛋白的表达与分泌,利用Ni-NTA金属螯合层析法和分子筛纯化p24s蛋白,并利用免疫印迹法检测该蛋白质的抗原特异性.通过间接ELISA法进行HIV-1阳性小鼠和HIV-1阳性感染者血清的检测.结果 成功构建了高效表达HIV-1 p24蛋白的真核表达系统,细胞上清中可检测到明显的p24s蛋白分泌.经HIV-1阳性和阴性小鼠,以及经临床验证的30份HIV-1阳性感染者和50份HIV阴性血清标本鉴定,重组蛋白具有较高的检出特异性和敏感性.结论 成功构建了HIV-1 p24抗原真核表达载体,表达纯化的p24s抗原具有较好的抗原性,初步建立了检测HIV-1的间接ELISA法,并证明该检测法具有较高的特异性和灵敏度,具有良好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵一鸣	中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心	140	694	14.0	20.0
2	王颖	潍坊医学院医学检验学系	11	42	4.0	6.0
3	宋伟	潍坊医学院医学检验学系	9	14	2.0	3.0
5	郝彦玲	中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心	7	6	1.0	2.0
8	陈祥雨	潍坊医学院医学检验学系	1	0	0.0	0.0